ARTEMIZININO TURINYS ARTEMISIJOS METU IŠRAŠYTI SKIRTINGI METODAI GAUTI t Soktoeva, G.L. Ryžovas, K.A. Dychko, V.V. Khasanov, SV Zhshzhitzhapova, LD Padnaeedo Buriato valstybinis universitetas, g. Smolinas, 24a, Ulan-Ude (Rusija) Tomsko valstybinis universitetas, 36, Leninos pr., Tomskas (Rusija) Baikalo gamtos valdymo institutas, Rusijos mokslų akademijos Sibiro filialas, ul. Sakhyanova, 8, Ulan-Ude (Rusija)

Aptariami klausimai dėl Artemizino izoliavimo iš Artemisia annua L. ir jo kiekybinio nustatymo naudojant HPLC-MS metodą. Artemizininas buvo išskiriamas įvairiais ekstrahavimo metodais: maceracija, ultragarsu ir subkritiniu CO2 išskyrimu. CO2 ir heksano ekstraktų komponentų sudėtis buvo tiriama GC-MS.

Įvadas

Artemizininas (1) yra peroksido sesquiterpenas [1], kuris yra labai veiksmingas antimalarinis vaistas ir stipresnių junginių, pvz., Artemeterio, artesunato ir kai kurių kitų, pirmtakas. Artemizinino ir jo darinių svarba yra pagrįsta labai greitu šio tipo junginio poveikiu jos pagrindiniam patogenui Plazmodium falciparum, kuris taip pat sukelia smegenų ligą. Nustatyta, kad cheminė ir biocheminė artemizinino sintezė yra labai brangi ir todėl šiuo metu yra neišvengiama kaip pagrindinis artemizinino gamybos šaltinis [2].

Maliarija sukelia mikroorganizmą - Plasmodium malaria. Žmogaus organizme yra 4 tokio tipo plazmodio, parazitų: Plazmodium vivax, P. ovale, P. malariae ir P. falciparum. XX a. Viduryje, plačiai naudojant chininą ir jo darinius, buvo galima žymiai sumažinti pacientų, sergančių maliarija, skaičių. Tačiau nuo 60-ųjų. praėjusio šimtmečio maliarija vėl priminė save. Tai įvyko dėl to, kad Tailande ir Pietų Amerikoje maliarija Plasmodium (P. falciparum), atspari chininui, chlorokvinui, meflokinui ir kitiems chinolino preparatams, atsirado ir išplito kitose srityse [3, 4]. Aktualus yra naujų veiksmingų antimalarinių vaistų, tarp kurių buvo pasiūlytas artemizininas, paieškos problema. Šis unikalus junginys buvo aptiktas Kinijoje (Kinijos pavadinimas yra qinghaosu). Darbai buvo pradėti 1967 m. Ir buvo vadinami „Programa 523“ [5]. Jis yra izoliuotas nuo kasmetinės Atemisia annua L. košės, kuri yra platinama buvusios TSRS teritorijoje, apimanti Altajaus, Transbaikalijos, Amūro regiono, Kazachstano, Kirgizijos, Uzbekistano ir Turkmėnijos teritorijas. Vyšninė yra plačiai atstovaujama Kinijoje ir kitose šalyse [6]. Bendras Artemisinino kiekis, išskirtas iš įvairių A. annua dalių, yra apie 0,01 ir 1,4% sausos lapų masės [2].

Artemisia annua L. yra pagrindinė artemisinino gamybos žaliava. 2001 m. Pasaulio sveikatos organizacija rekomendavo naudoti artemezininą pirmojo gydymo maliarijos kontrolei srityje, dėl to padidėjo plotas po vienerių metų sliekų. Daugiausia kasmet auginama Rytų Azijoje, daugiausia Kinijoje ir Vietname (70 proc. Pasaulio išteklių), neseniai į Rytų ir Pietų Afrikos kultūrą (20 proc. Pasaulio išteklių ploto), kuri sudaro ketvirtadalį pasaulinių sveikatos poreikių [7].
Be artemizinino, A. annua yra vertinamas dėl eterinio aliejaus, pasižyminčio būdingu saldus, žolinis aromatas ir naudojamas kvepalų ir kosmetikos gaminiuose. Be to, aliejus pasižymi antibakterinėmis savybėmis ir gali būti naudojamas odos ligoms gydyti. Be seskviterpeno laktonų, kurių pagrindinė terapinė vertė yra, šio augalo eteriniai aliejai turi didelį kiekį komponentų, kurių vertė yra tokia, kaip 1,8-cineoleum, alkoholis ir ketonas, borneolis ir kiti. taip pat išanalizavo fiziologinį lipofilinių ekstraktų poveikį odai [2].
Atsižvelgiant į turtingą ir įvairią biologiškai aktyvių medžiagų sudėtį, esančią „Artemisia annua“, naujų domenų auginimo sričių paieška yra labai svarbi. Buriatijos Respublikoje auga 46 polinumo rūšys [8], įskaitant Artemisia annua L. Artemidino kiekis Lenkijoje, vienerių metų amžiaus, augantis Buriatijoje, anksčiau nebuvo tiriamas. Todėl šio darbo tikslas buvo kiekybinis artemizinino kiekio nustatymas ekstraktuose, gautuose įvairiais ekstrahavimo metodais.

Eksperimentinė dalis

Tyrimo žaliava buvo pasirinkta virš žemės dalies Lenkijos metinio „Artemisia annua L.“, surinkto 2010 m. Rugpjūčio pirmąjį dešimtmetį žydėjimo fazėje.
Artemizinino ir kitų biologiškai aktyvių medžiagų (eterinio aliejaus) išskyrimas buvo atliktas naudojant įvairius ekstrakcijos metodus: maceraciją, ultragarso ekstrakciją ir subkritinį CO2 išskyrimą. Buvo atlikta laboratorinių įrenginių gavyba. Kaip ekstrahentai buvo naudojami heksanas, etilacetatas, etanolis ir CO2. Duomenys ir ekstrahavimo parametrai parodyti 1 lentelėje. Iš nuosėdų išskiriami ekstraktai centrifuguojant OP-8UHL4.2 centrifugoje, esant 5000 aps./min., Ir tada filtruojami per mėginių filtravimo sistemą.
Artemizinino kiekio nustatymas buvo nustatytas HPLC-MS, naudojant „Finnigan Surveyor“ didelio našumo skysčių chromatografą su autosampler Plus Plus autosampleriu ir LC Pump Plus siurbliu su LCn Advantage MAX (jonų gaudyklė) Finnigan detektoriumi, jonizacijos metodas - elektrospray. Stulpelis "Hypersyl Gold" 150 × 4 mm, pripildytas silikagelio sorbentu su C18 skiepijimo fazėmis (5 μm dalelių dydis) (pagamintas Thermo electronic Corporation, JAV). Eliuavimas buvo atliktas izokratiniu režimu (50% (A): 50% (B)), pradinio buferio (A) kompozicija buvo skruzdžių rūgšties vandeninis tirpalas (pH = 3) + 2 ml prisotinto amonio acetato tirpalo, eliuavimo buferis (B) - 100% acetonitrilo. Eliuento tūrinis srauto greitis yra 0,5 ml / min., Švirkšto mėginio tūris (automatinis mėginys) yra 25 μl. Jonų registracija buvo atlikta teigiamo krūvio jonų stebėjimo režimu (Selected Ion Monitoring, SIM), kurios molekulinė masė 300 (dėl amonio jonų NH4 pridėjimo prie artemizinino molekulės) su lango pločiu (299-301) m / z. Kiekybinis nustatymas buvo atliktas naudojant vidinį standartinį metodą, naudojant valstybės standartinį mėginį iš „Sigma“.

Ekstrahavimo metodai ir parametrai

Nr. P / p Ekstrahavimo metodas Ekstraktantas Ekstrahavimo laikas / ekstrahavimo parametrai Artemizino kiekis%, pagal a.s.s.
1 Etanolio 24 h / žaliavų: tirpiklio santykis (1: 5) 0,040 ± 0,002
2 Maceracijos etanolis 48 h / žaliavos: tirpiklio santykis (1: 5) 0,038 ± 0,002
3 Heksano makravimas 24 val. / Mėginio santykis: tirpiklis (1: 5) 0,039 ± 0,002
4 Ultragarso ekstrakto etanolis 15 min. / Žaliavų santykis: tirpiklis (1: 5), skambėjimo dažnis 50 Hz, T = 25 ° C 0.039 ± 0.002
5 Ultragarsinis ekstrahavimas etilo acetatu 15 min. Žaliavos: tirpiklio santykis (1: 5), skambučio dažnis 50 Hz, T = 25 ° C 0,022 ± 0,001
6 CO2 išskyrimas, todėl 2 24 h / srauto greitis 30 l / h, T = 20-22 ° C, P = 6,0-6,2 MPa 0,054 ± 0,003

Be to, CO2 ir heksano ekstraktų lakieji komponentai buvo tiriami chromatografiniu masių spektrometrijos metodu Agilent Packard HP 6890 dujų chromatografu su MSD 5973N kvadrupolio detektoriumi. Mes naudojome 30 metrų kvarco kolonėlę TR-5 ms, kurios vidinis skersmuo yra d = 0,25 mm, plėvelės storis 0,25 μm. Chromatografinis atskyrimas buvo atliktas taip, kaip aprašyta [9]. Kokybiškai ekstraktų komponentai buvo nustatyti lyginant visą masių spektrą su augalinės kilmės lakiųjų medžiagų chromatografinės masės spektrometrinių duomenų bibliotekos duomenimis A.V. Tkachev, bibliotekos NIST 08 ir Wiley 275. Analizės rezultatai pateikti 2 lentelėje.

Pagrindiniai CO2 ir heksano ekstraktų komponentai
Didžiausias santykinis plotas Ryšys Didžiausias santykinis plotas
CO2-ekstrakto heksano ekstrakto junginiai
CO2 ekstraktas Heksano ekstraktas
Monoterpenoidai ilgos grandinės angliavandeniliai
Triciklilenas 140181 - tricanas 103969 52288
a-pineinas 1155320 - Tricozen-1 1956324 -
Camphene 2021028 - n-pentakozanas 534763 110485
R-pinen 371548 1683858 645634 - - -
n-heptakozanas 279800 132358
3-caren

Cikliniai angliavandeniliai
Limonen
Pentaciklo 576196 -
R-phellandren 587143 - [7.5.0.0 (2.8).0 (5.14) 0).
1,8-cineolis 133599 - (7.11)] tetradekanas
Artemisia ketonas 1413437 - 1,8-dimetilfenantrenas 3765681 1080289
Borneol 170158 707945 - - Flyuoren 3507465 319501
Bornyilo acetatas

Diterpenoidai
Sesquiterpenoids
Metil 3,5-bis (etilamino) benzoatas 627581 283913
Cariofillen 370714 214560 - -

Kariofileno oksidas
Germacren D 214913 -
R-Selinene 3053333 328535
a-cadinol 149485 -

Rezultatų aptarimas

Kaip matyti iš 1 lentelėje pateiktų duomenų, mažiausias artemizinino derlius buvo (0,022%) su ultragarsu ekstrahuojant etilacetatu. Artemizinino kiekis ekstraktuose, išskirtuose ultragarsu ekstrahuojant ir maceruojant, naudojant skirtingus tirpiklius (heksanas, etilo alkoholis), reikšmingai nesiskiria 0,038-0,040% pagal A. p. Reikalaujant, kad etilo alkoholio sliekinys kasmet būtų 24 ir 48 valandos, artemizinino kiekis gautuose ekstraktuose yra maždaug toks pat, kaip atitinkamai 0,040 ir 0,038%. Didžiausias artemizinino derlius (0,054%) buvo gautas iš anksto kritinio CO2 išskyrimo metu. Palyginimui, pateikiame keletą duomenų apie artemezinino turinį, vienerių metų viščiukų, augančių įvairiose teritorijose. Artemisia annua L., kuris auga įvairiose Kinijos dalyse, yra nuo 0,01 iki 0,22% artemizinino. Kai kurių Kinijoje ir Vietname auginamų viščiukų hibridų sudėtyje yra 1,0–1,5% artemizinino [10]. Buvusios TSRS teritorijoje augančio A. annuoje esančio artemizinino kiekis yra toks (vertybės pateikiamos kaip sausos žaliavos): Gruzijos SSR (0,005%), Kirgizijos SSR (0,025%), Moldovos SSR (0,01-0,02%), Krasnodaro teritorija (0,04%), Ukrainos SSR (0,005–0,05%), Turkmėnistanas (0,05% pagal a.s.c.), Kazachstanas (0,01–0,05% pagal A.S.S.) [11].
Ištyrus kasmetinio gervuogių ekstraktų, gautų naudojant CO2 ekstrahavimą ir maceraciją, sudėtį, kai heksanas buvo naudojamas kaip ekstrahantas, chromatografijos ir masės spektrometrija atskleidė reikšmingus šių ekstraktų sudėties skirtumus. Monoterpenoidai, sesquiterpenoids, ilgos grandinės angliavandeniliai, cikliniai angliavandeniliai ir diterpenoidai aptinkami masių spektrometrijos metodu.
Monoterpenoidai randami tik CO2 ekstrakte. Pagrindiniai CO2 ekstrakto komponentai yra a-pineinas, 3-caren, artemisia ketonas (3-selenenas, tricozen-1, 1,8-dimetilfenantrenas ir fluorenas).

Sliekų heksano ekstrakte metinė dujų chromatografija - masių spektrometrija, daugiausia buvo nustatyti ilgos grandinės angliavandeniliai ir cikliniai angliavandeniliai, 3-selenenas buvo aptiktas iš sesquiterpenoidų.
Be artemisinino, kuris yra pirminės medicininės vertės, eteriniame aliejuje yra daug biologinės vertės komponentų, tokių kaip artemizijos ketonas, 1,8-cyneolis, borneolis ir kt.

Išvados

1. Artemizino kiekis įvairiuose A. annua ekstraktuose (antenos dalis, žydėjimo fazė), augantis Buriatijos Respublikos teritorijoje, nustatytas HPLC-MS.
2. Maksimalus artemisinino kiekis randamas CO2 ekstrakte (0,054% pagal a.s.c.),
3. Naudojant chromatografinę masių spektrometriją, ištirta eterinio aliejaus, ekstrahuoto įvairiais ekstrahavimo metodais, sudėtis.

Artemisia annua L.
Taksono aprašymas

Rusijos vardai

Sistematika

Vaizdai

Augalai žemėlapyje

Botanikos aprašymas

Artemisia annua L. Sp. pl. (1753) 847; Bess. Nouv. Mem. Soc. Nat. „Mosc“. III, 81; Dc. Prodr. VI, 119; Ldb. Fl. Ross. II, 592; Boiss Fl. arba. III, 371; Maxim Bull. Acad. Sc. Petersbas. Viii, 528; Kablys Fl. Br. Ind. III, 323; Kom į fl. Manch. III, 659; Nakai, Fl. Korėjiečių. II, 30; Fedch. Sąrašas var. Turk IV, 200; Rydb. Šiaurės Am. Fl. 34, 3 dalis, 259; Pampanas Nuovo mieste. Giorn. Bot. Ital. n.s. XXXIV, 637; Hall ir Clem. Artem (1923) 102; Kom ir alice. Pasirinkti. var. Tolimuosiuose Rytuose kr. II, 1036; Krasheninn. į fl. į pietryčius Europ SSRS dalis, VI, 357; Grossg. Fl. Kavk. IV, 138; Krasheninn. ir sparnai. Fl. Zap. Sib. XI, 2816; Pole Mayevsky, FL. 586. - A. chamomila Winkl. Tr. Sankt Peterburgas botas Sodas, X, 87; Fedch. cit. cit. - Ic.: Amm. Stirp. rar. t. 193, f. 23; Gmel. Fl. sib. II skirtukas. 25. - Exs: ГРФ № 3152. - Vienerių metų kirmmedis.

Metinis Augalas yra aromatingas, žalias, plikas arba su išsibarsčiusiais, mažais gretimais plaukais, su tiesiu, briaunotu, rusvu ar violetiniu rusvu stiebu 30–100 cm aukščio. lapai yra dotted-fossa-ferruginous, apatinis petiolate, 3-5 cm ilgio. ir 2-4 cm pločio., ovalo formos, tris kartus viršūnės, paskutinės eilės segmentai, pailgos, skersinės, trumpos; visas arba su 1-2 dantimis, 1-2 mm ilgio. ir 0,5 mm pločio; viduriniai ir stiebo lapai yra dvigubi, viršutiniai, mažesni ir mažiau sudėtingi, viršutinės sijos yra paprastos arba su nedideliu šoninių skilčių skaičiumi. Krepšiai yra sferiniai, 2–2,5 mm pločiai, daug, atmetami arba nuleidžiami trumpomis kojomis, braižomi trumpose šakose, b. m. ilgas, piramidinis panicle žiedynas; apvalkalas yra lygus, išoriniai lankstinukai yra tiesiai pailgos, žalios, vidinės ovalios arba beveik apvalios, aplink kraštą apjuosiama blizgus kraštas; išgaubtas indas; ribinės gėlės, 10–20, karūnos formos, tauriųjų liaukų, siaurai linijinės, stigmos skiltelės, obtuse, eksponuojamos iš vamzdžio; disko gėlės yra biseksualios, 12–30 vnt., siauros formos vamzdinės, nuogas; siaurai linijinės, viršutinės apatinės dalies pailgos, ūminio kampo, bazinės skilties labai trumpos, pažymėtos; stulpelis yra trumpesnis nei kuokelių, stigmos stigma yra tiesi, tiesi, šiek tiek nukrypusi, smailė viršūnėje; achenes 0,8–0,6 mm ilgio, pailgos-ovalo formos, plokščios, ant viršūnės su maža apvalia platforma, vos užsuktos palei kraštą. Spalva VIII - IX.

Neturėtose vietose šalia būsto, sodų, soduose. - Europa. h.: ​​Aukštutinė Dniestras., Aukštutinė Dniepras., Volz. Don., Volga., Žemutinė. Don., Juoda., Bess., Krymas; Kaukazas: Zap ir Rytų. Trans., Tal., Trečiadienis Azija: Aral-Casp., Balkh., J.-Tarb., Tien-Shan., Sir-Dar., Pam. - Al., Amu-Dar. Turk Iš viso var.: Tre Heb., Srediz., Balk. -Maloaz., Arm.-Kurd., Iranas, J.-Kashg., Kit., Jap., Mongolija, Šiaurės. Amerika (užsienietis).

Vaizdas yra Ammano ir Gmelino brėžiniai.

Khoz. vertė Eterinio aliejaus derlius yra 0,1–0,64% (pagal Goryaevą). Joshikazu Imade (1937) teigimu, aliejuje yra cineolis ir medžiaga C10H6O; šią medžiagą išsamiai ištyrė Ashania ir Joshitomi (1917); kartu su artemacyaketon, jo izomeras, isoartemisieacetonas, buvo rastas aliejuje. Šis ketonas galėjo izoliuoti iš motininio tirpalo, likusio gaminant artemacacetono semikarbosoną. Seisi Takagi (1928), tęsdama Japonijos A. Annua tyrimą, į keturis komponentus, žinomus naftos produktais, pridėjo dar 2 naujus: cadinene ir karyophillen. Remiantis Rutovskio ir Vinogradovo (1929 m.) Tyrimais, aliejus susideda iš α-pineino, cyneolio, kampeno, artemidiaketono ir izoartemizidono, nedidelio kiekio borneolio, acto ir sviesto rūgščių, kimuno aldehido (galbūt semikarbosono) ir fenolio (tikriausiai eugenolio). Mažas alkaloidų kiekis rastas požeminėse dalyse (Lazurievsky, Sadykov, 1939; Massagetov, 1947). Remiantis lauko stebėjimais (Yunatov, 1954), žalioje valstybėje gyvuliai nevalgo. Alkaloidų buvimą patvirtina M.I. Goryaeva, G.K. Kruglykhina, E.I. Satdarova (1959).

Santrauka ir disertacija apie vaistą (04/04/02) tema: „Artemisia annua L.“ ir „Artemisia sieversiana Willd“ farmakognostinis tyrimas. Buriatijos augmenija

Disertacijos santrauka medicinoje tema „Artemisia annua L. ir Artemisia sieversiana Willd“ farmakognostinis tyrimas. Buriatijos augmenija

Kaip rankraštis

Soktoeva Tuyana Erdemovna

FARMAKOGNOSTIKOS MOKSLINIŲ TYRIMŲ ARTEMISIJA ANNUA L. IR ARTEMISIA SIEVERSIANA WILLD. BURYATIJOS SKYRIAI

04/14/02 - farmacijos chemija, farmakognozija

Disertacijos santrauka farmacijos mokslų kandidatui

Disertacinis darbas buvo atliktas Rusijos Federacijos Švietimo ir mokslo ministerijos federalinės valstybės biudžeto švietimo aukštojo mokslo švietimo įstaigoje „Buriato valstybinis universitetas“ ir Rusijos mokslų akademijos, Rusijos mokslų akademijos Sibiro filialo Baikalo aplinkos vadybos instituto įkūrimas.

Vadovas: chemijos mokslų daktaras, profesorius

Radnaeva Larisa Dorzhievna

Oficialūs oponentai: biologijos mokslų daktaras, profesorius

Antsupova Tatjana Petrovna

Farmacijos mokslų kandidatas Mongolov Hanhai Purbuevich

Pagrindinė organizacija: Permė

Rusijos Federacijos Sveikatos ir socialinės plėtros ministerija

Apsauga vyks 2011 m. Gruodžio 23 d., 10 ° oh, disertacijos tarybos posėdyje DM 003.028.02 SB RAS Bendrosios ir eksperimentinės biologijos institute adresu: 6, Sakhyanova St., Ulan-Ude, 670047.

Disertaciją galima rasti SB RAS Buryat mokslinio centro centrinėje mokslinėje bibliotekoje.

Santrauka paskelbta 2011 m. Lapkričio 22 d.

Disertacijos tarybos mokslinis sekretorius Biologijos mokslų kandidatas

BENDRAS DARBO APRAŠYMAS Temos aktualumas. Artemisia genties augalai yra daug žadantys biologiškai aktyvių medžiagų šaltiniai, pvz., Tarragono kirmmedis Artemisia dracunculus L., ožkmedis Artemisia absinthium L., plaukuotas medus Artemisia vulgaris L. plačiai naudojamas liaudies, tradicinėje medicinoje ir maisto pramonėje. „Artemisia annua L.“, kasmetinė viščiukas, buvo sėkmingai įvežta į kultūrą daugelyje šalių, o 2001 m. Rekomendavo PSO kaip pagrindinį artemizinino, pirmos eilės gydymo malarija, šaltinį. Šiandien artemisininą gaminančios šalys sudaro apie ketvirtadalį pasaulinių sveikatos poreikių (Tolstikova, 2010; Xiao Wang, 2011). 137 metų biologiniai aktyvūs junginiai buvo izoliuoti, įskaitant 40 sesquiterpenes, 10 triterpenų, 7 kumarinus, 46 flavonoidus, kurie gali būti vaistų kūrimo pagrindas (Bhakuni, 2001). XX a. Devintojo dešimtmečio mokslininkų grupė (Schroeter, 1989) CISA (Maskva) bandė užauginti SSRS vienerių metų floros augmeniją. Šiandien Tomsko valstybiniame universitete atliekami svarbiausi darbai, skirti pirmųjų metų pristatymui. Buriatijoje n. Metinė yra laukinių augalų rūšis.

Kartu su kasmetiniu parazitu Buriatijoje, Sivers kirminas Artemisia sieversiana Willd yra plačiai paplitęs, taip pat perspektyvi rūšis. Seaberos žolėje yra flavonoidų, eterinio aliejaus, kumarinų (Tkachev, 2002; Shatar, 1998; Hanina, 1999; Suleimenov, 2009). Siverių eterinis aliejus domina chamazuleno, netoksiško junginio, turinčio priešuždegiminį, baktericidinį, regeneracinį poveikį, šaltinį (Berezovskaya, 1991; Khanina, 1992).

Iki šiol išsamus metinis Buriatijos floros augalijos „Sivers“ audra ir kirmėlės tyrimas nebuvo atliktas kaip perspektyvūs biologiškai aktyvių medžiagų šaltiniai, todėl jų tyrimas yra neatidėliotinas uždavinys.

Tikslas: Farmakognostinis tyrimas su Sivers kirminais Artemisia sieversiana Willd. metinis „Artemisia annua L.“ kaip vertingas biologiškai aktyvių medžiagų šaltinis.

Siekiant šio tikslo būtina išspręsti šias užduotis:

1. Nustatyti vienų metų amžiaus Sivers ir P. antenos dalies anatominius ir diagnostinius požymius, siekiant nustatyti prekybos rodiklius

žaliavų, vertinti rezervus ir galimybę surinkti vienerius metus ir S. Siversą Buriatijos Respublikos teritorijoje;

2. Ištirti šių augalų biologiškai aktyvių medžiagų pagrindinių grupių cheminę sudėtį ir nustatyti jų kiekybinį turinį, nustatyti eterinių aliejų ir artemizinino lokalizaciją atskirose augalų dalyse, tirti jų kaupimosi dinamika vystymosi fazėse ir nustatyti optimalias surinkimo sąlygas;

3. Sukurti artemizinino kiekybinio nustatymo metą vieno metų amžiaus ore;

4. Nustatyti pagrindinių biologiškai aktyvių medžiagų turinio rodiklius ir standartus, parengti vaistų žaliavų reguliavimo dokumentaciją - Sivers kirminų žolę ir vienerių metų viščiukų žolę.

Mokslinė naujovė. Nustatyti pagrindiniai Siverio ir P. metinės žolės diagnostiniai bruožai, sukurti skaitmeniniai žaliavų standartizavimo rodikliai.

Buvo atliktas tyrimas apie Siverio žolės ir vienerių metų žolės cheminę sudėtį. Nustatytas eterinių aliejų, flavonoidų, riebalų rūgščių, makro ir mikroelementų kiekis. Flavonoidai - luteolinas-7-gliukozidas, rutinas, kvercetinas ir chrizoolis buvo aptikti HPLC-MS metodu šiuose augaluose. Pagrindinės riebalų rūgštys tiriamose viščiukų rūšyse yra palmitinės, linolinės, linoleninės, 10% oktadekeniškos rūgšties, taip pat randamos didelėse viščiukų.

Nustatyta artemizinino (ekstrahavimo, ekstrakcijos metodo, ekstrahavimo laiko) išgavimo iš metinių žolių sąlygos ir nustatyta, kad maksimalus artemizinino ekstrahavimas pasiekiamas ultragarsu ir subkritiniu CO2 išskyrimu. Pagal HPLC-MS nustatyta, kad didžiausias menemidino kiekis vienerių metų amžiaus žiedynuose yra žydėjimo fazėje.

Ištyrė eterinio aliejaus kaupimosi dinamiką, priklausomai nuo vystymosi etapo ir augalo dalies. Didžiausias kiekis chazazuleno eterinio aliejaus p. Siversa kaupiasi žiedynų žydėjimo ir žydėjimo fazėse.

Nustatyti BAS kokybės rodikliai įtraukti į reguliavimo dokumentus.

Praktinė reikšmė. Siverso gyvenvietės rezervai ir galimas metinis pirkimų apimtis bei vienerių metų atsiskaitymas Buriatijos Respublikos teritorijoje (Siverso gyvenvietė - nuo 0,1 iki 73,7 tonų per metus ir vienerių metų atsiskaitymas - nuo 1,2 iki 122,3 tonų per metus).

Metodas buvo sukurtas artemizinino kiekybiniam nustatymui p. Grass metiniame HPLC-MS metode. Molekulinio artemizinino kiekybinio nustatymo žaliavų mėginio paruošimo sąlygos yra moksliškai pagrįstos.

Atlikta žaliavų standartizacija, sukurti FS projektai - „Sivers Wormwood Herbal“ ir „Wormwood One-Year Grass“.

Įgyvendinimo laipsnis. Eterinių aliejų ir mikroskopinių analizės duomenų išgavimo metodas buvo išbandytas ir įtrauktas į Federalinio valstybinio aukštojo mokslo įstaigos „Buryat State University“ Farmacijos departamento edukacinį procesą (2011 m. Rugsėjo 6 d. Įgyvendinimo įstatymas Nr. 1). FS projektai „Siverio viščiukų“ ir vienerių metų viščiukų žolei yra paruošti svarstyti.

Atsakymas į gynybą:

• Buryatijoje augančio Siverio ir P. anatominės struktūros, atsargų, autentiškumo kriterijų tyrimo rezultatai;

• biologiškai aktyvių medžiagų cheminio tyrimo rezultatai ir jų sezoninė kaupimosi dinamika;

• Siverio viršutinės dalies standartizavimo tyrimų rezultatai p. Ir p.

Darbo aprobavimas. Pagrindinės disertacijos nuostatos buvo pristatytos ir aptartos: mokslinėje-praktinėje konferencijoje su tarptautiniu dalyvavimu „Tradicinės medicinos plėtra Rusijoje: patirtis, moksliniai tyrimai, perspektyvos“ (Ulan-Ude, 2010); 7-asis žiemos simpoziumas apie chemometriją „Šiuolaikiniai duomenų analizės metodai“ (Sankt Peterburgas, 2010); tarptautinė mokslinė konferencija, skirta „Buriato valstybinio universiteto„ Baikalo Azijos studijos “15-mečiui (Ulan-Ude, 2010); V tarptautinė mokslinė-praktinė konferencija „Baikalo regiono plėtros prioritetai ir ypatybės“ (Ulan-Ude, 2011); X tarptautinė mokslinė-praktinė konferencija „Pietų Sibiro ir Mongolijos botanikos problemos“ (Barnaul, 2011); IV All-Russian Conference „Nauji augalų medžiagų chemijos ir chemijos technologijų pasiekimai“ (Barnaul, 2009); XVI Tarptautinė studentų, antrosios pakopos ir jaunųjų mokslininkų konferencija „Lomonosovas-2009“ (Maskva, 2009); XV Tarptautinė ekologinė studentų konferencija „Rusijos ir gretimų teritorijų ekologija“ (Novosibirskas, 2010); II Visos Rusijos mokslinė-praktinė studentų, absolventų ir jaunųjų mokslininkų konferencija „Chemijos, biotechnologijos ir maisto pramonės technologijos ir įranga“ (Biysk, 2009); Visų Rusijos mokslinė-praktinė konferencija „Augalija

Baikalo regionas ir gretimos teritorijos “(Ulan-Ude, 2011); V Rusijos jaunųjų mokslininkų mokyklos seminaras „Tvaraus regiono vystymosi problemos“ (Ulan-Ude, 2009); regioninė jaunimo mokslinė-praktinė konferencija, kurioje dalyvauja tarptautinis dalyvavimas „Ekologiškos ir išteklių taupymo technologijos ir medžiagos“ (Ulan-Ude, 2010).

Darbas buvo atliktas kaip mokslinių tyrimų projektų dalis: RFBR: 08-04-90202-Mong_a "Biologiškai aktyvių Vidurinės Azijos augalų biologinių junginių biosintezės modelių tyrimas" (2008-2009), 08-04-98037-r_sibir_a "Cheminė augalų sudėtis kaip indikatorius Baikalo regiono ekosistemų būklė “(2008–2020 m. Yugg,); tarpdisciplininis integracijos projektas Nr. 93 „Mokslinių tyrimų pagrindai medicinos chemijos ir farmakologijos srityje, kaip mokslinis pagrindas narkotikų vystymui“; bendras projektas su Mongolijos mokslų akademija „Naujų narkotikų, naudojančių natūralias žaliavas, lipo ir nanosominių formų gavimas“; RFBR: 10-03-16001-mob_ros "Jaunųjų mokslininkų mobilumas" (2010), 11-03-90705-mob_st jaunų Rusijos mokslininkų mokslinis darbas pirmaujančiose Rusijos Federacijos mokslo organizacijose 2011 (2011).

Leidiniai. Remiantis gautais rezultatais, buvo paskelbti 17 mokslinių straipsnių, iš kurių 3 buvo paskelbti Rusijos Federacijos Gynybos ir mokslo ministerijos Aukštojo atestavimo komisijos rekomenduojamuose periodiniuose leidiniuose.

Darbo apimtis ir struktūra. Disertacijos darbas pateikiamas 172 puslapiuose spausdintinio teksto, jį sudaro įvadas, literatūros apžvalga (1 skyrius), eksperimentinė dalis (4 skyriai), bendrosios išvados, literatūros sąrašas ir paraiškos. Darbą iliustruoja 37 lentelės ir 61 paveikslas. Bibliografiniame indekse yra 139 šaltiniai, iš jų 42 užsienio.

Įžangoje pagrindžiamas temos aktualumas, suformuluotas tyrimo tikslas ir uždaviniai, pateikiamas darbo mokslinis naujumas ir praktinė reikšmė.

Pirmajame skyriuje (literatūros apžvalga) pateikiami duomenys apie cheminę sudėtį, farmakologinio aktyvumo spektrą, Artemisia L. genties naudojimą tradicinėje ir modernioje medicinos praktikoje.

Antrajame skyriuje (medžiagos ir metodai) pateikiami duomenys apie studijų objektus, metodus, prietaisus ir reagentus, kitą metodinę informaciją.

Trečiajame ir ketvirtame skyriuose pateikti duomenys apie Severs S ir vienerių metų anatominių ir diagnostinių požymių tyrimą. Pagal metodą

UV spektrofotometrija nustatė bendrą flavonoidų ir taninų kiekį tyrimo objektuose. GC-MS pagalba buvo ištirtas eterinio aliejaus ir varškės rūgščių kokybinė ir kiekybinė sudėtis. HPLC-MS metodas nustatė kokybinį ir kiekybinį flavonoidų kiekį. Elementinė augalų sudėtis buvo nustatyta AAS metodu. Buvo sukurta ir siūloma artemizinino kiekio nustatymo technika. HPLC-MS. Be to, ištyrėme penkių rūšių poliesterių eterinių aliejų chemines kompozicijas, kurios dažniausiai randamos Buriatijos ir Mongolijos teritorijoje - „Gmelin Artemisia gmelinii Web kirminų“. et Stechm., košelė, pilka Artemisia glauca Pall, ex Wild., košelė, didelė drobė Artemisia macrocephala Jacq. buvęs Bess., Sievers kirminas Artemisia sieversiana Willd. ir Artemisia annua L.

Penktajame skyriuje pateikiami duomenys apie vienerių metų Siverio ir P. žolelių standartizaciją, siūlomus kaip perspektyvius chamazuleno ir artemizinino šaltinius.

Pagrindinis darbo turinys

Tyrimo objektai ir metodai. Tyrimo objektas buvo „Sivers“ žolės pavyzdžiai ir kasmetiniai kaimai, surinkti Irkutsko regiono (Olkono salos) ir Mongolijos (Selenginsky Aimak) įvairiose Buriatijos Respublikos (Ivolginsky, Pribaikalsky, Selenginsky, Tunkinsky, Zakamensky, Kurumkansky) rajonuose nuo 2008 m. iki 2011 m

Mikroskopinė analizė buvo atlikta pagal straipsnį "Mikroskopinės analizės metodas" (GF XI, 2 klausimas) dėl mikroskopų (Lomo, Rusija) su okuliaru 10x; 4x, 10x, 40x ir MS-300 (TFXS) lęšiai, fluorescencinės sistemos rinkinys (Micros, Austrija) su 10x okuliaru; 4x, 10x, 40x lęšiai. Žaliavų derlius buvo nustatytas apskaitos vietų metodu.

Eterinio aliejaus ekstrahavimas buvo atliekamas hidrodistiliuojant, ekstraktai buvo gauti ultragarsu, CO2 ekstrahuojant ir maceruojant.

Šių objektų kokybinės ir kiekybinės sudėties tyrimas atliktas taikant šiuos metodus: GC-MS, HPLC-MS, TLC, BC, UV spektrofotometrija ir AAS. Chromato masės spektrometrinė analizė atlikta Agilent 6890 dujų chromatografu su HP MSD 5973N kvadrupolio masės spektrometru (Agilent Technologies, JAV; stulpeliai: HP-5ms, g = 0,25 mm, plėvelės storis 0,25 μm (kopolimeras - 5%, difenilas - 95% dimetilsiloksano) ir DBWax, kurio vidinis skersmuo yra 0,25 μm, nešiklio dujos - helis, g) srautas 1–1,5 ml / min; HPLC-MS analizė buvo atlikta su aukštos kokybės skysčių chromatografais Finnigan Surveyor (Thermo Scientific, JAV) ir Agilent 1200 (Agilent Technologies,

JAV) su prekės ženklo „Finnigan“ (Thermo Scientific, JAV) masiniu selektyviu detektoriumi „LCQ Advantage MAX“ ir „Tandem“ masės spektrometriniu detektoriumi („jonų gaudyklė“) 6330 (Agilent Technologies, JAV), metodas jonizavimo elektrospray; sąlygos: Hypersyl Gold Cl8, 5 mikronai, 150x4 mm kolonos (Thermo electronic Corporation, JAV) ir Zorbax Eclipse C18, 5 mikronai, 4,6 * 150 mm (Agilent Technologies, USA), eluento srautas 0,5 ml / min. TLC analizė atlikta su Sorbfil PTSH-P-A-UV plokštelėmis (Imid Ltd, Rusija); BC analizė atlikta FN 6 popieriuje (Filtrak, Vokietija); Absorbcijos spektrai buvo registruojami StellarNet Green Waiv spektrometre (StellarNet Inc, JAV), AAC analizė buvo atlikta su SOLAAR MB spektrofotometru (Thermo Scientific, JAV) ir Varían modeliu AA240 (Varian, Rusija).

Statistinis eksperimentinių duomenų apdorojimas buvo atliktas pagal variacijos-statistinės analizės metodą. Dalis duomenų buvo apdorota CIM (programinės įrangos paketas Sirius 6.0, Pattern Recognition Systems, a / s, Norvegija).

Vasaros P. Siverio ir P. žolės farmakologinės charakteristikos. Šie vaistinių žaliavų kokybės rodikliai. Siveris kirminų žolė. Visos žaliavos. Kietosios arba iš dalies lapinės žydinčių stiebų viršūnės, kurių ilgis ne didesnis kaip 45 cm, be stambių stiebo dalių. Stiebo plaukuotumas, tiesus, briaunotas ir šakotas. Radikalūs ir viduriniai lapai yra petiolatai, plataus trikampio formos, tris kartus perlai, pailgos plokščios griežinėliai, 1,4 - 2,5 cm ilgio, 0,1 - 0,5 cm pločio, pusrutulio krepšiai, skersmuo 0,4 - 0,6 cm, plati paniculate žiedyno. Geležies kraštai (apie 18). Gėlės biseksualios, daug, su piltuvėlio formos korolla.

Žolės vištienos metinis. Visos žaliavos. Kietosios arba iš dalies lapinės žydinčių stiebų viršūnės, kurių ilgis ne didesnis kaip 50 cm, be stambių stiebo dalių. Stiebas yra plikas, tiesus, įdubęs, žalias augimo sezono pradžioje, tamsiai violetinė. Apatinių ir vidurinių stiebo lapų lapai yra kiaušinio arba ovalo formos, 1,5–7,0 cm ilgio, ant ilgio, elipsės ilgio, be sparnų, tris kartus pernelyg išreikšti į plačius segmentus, segmentus ir segmentus, kurių ilgis yra nuo 0,5 iki 0,8 cm. daugiau kaip 0,2 cm, krepšiai, kurių skersmuo yra apie 0,2 cm.

Vienus metus atlikus P. Siverio ir P. žolės anatominį tyrimą, buvo nustatyti keli anatominiai ir diagnostiniai požymiai. Sliekų lapų struktūra pateikta 1 lentelėje. Siverio kirmmedžio kotelis yra šiurkštus, pailgos epidermio ląstelės.

Yra eterinių aliejų liaukos, T formos plaukai ir apvalios stomatinės ląstelės. Stiebas turi šviesos tipo konstrukciją. Be šonkaulių yra plonos zonos. Apskritai išdėstytos žiedinės sijos pasižymi stipriai išsivysčiusia sclerenchyma. Gerai pažymėtas endodermas, sudarytas iš didelių, plonų sienelių, apvalios formos, glaudžiai greta viena kitos.

Siverio lapų anatominės struktūros ypatybės ir p. Vienerių metų __

Siverių kirmmedžio epidermio kirmėlės kasmet

viršutinės tiesios sienos tiesios sienos

apatinė apvijų siena yra žema

Ustigichesky aparato viršutinės anomocitinės rūšies

mažesnė anomocitinė, stomata daugiau nei viršutinėje lapo pusėje

stomata ovalo formos su lęšių stomatinėmis ląstelėmis

Labai plaukuotųjų plaukelių su T formos plaukais, susidedančiais iš dviejų, keturių ląstelių kojų ir daugelio ląstelių plaukuotų plaukelių, charakteristikos yra dviejų tipų plaukai - stellatas ir T formos, o daugialypė kojelė

terpenoidų turinčios struktūros yra daugelio ląstelių, didelių eterinių aliejų liaukų. schizogeninės talpyklos ir nespecializuotos parenchiminės ląstelės

vienerių metų amžiaus, griovelio, beveik pliko stiebo, pailgos epidermio ląstelės. Vienerių metų kojose, o taip pat ir S. Siverio kotelyje, puchkovy tipo struktūroje, yra eterinių aliejų liaukos, retai plaukai ir ovalios stomatinės ląstelės. Abiejų rūšių viščiukų epidermio ląstelės ant vamzdinių žiedų korelos yra plonos sienos, pailgos su smailiais galais, kuriai būdingas didelis skaičius eterinių aliejų liaukų ir plaukų nebuvimas.

Prekybos rodikliai nustatyti kelioms žaliavų partijoms:

Siveris kirminų žolė. Drėgmė (ne daugiau kaip 7%), bendras pelenų kiekis (ne daugiau kaip 11%), 10% druskos rūgštyje netirpių pelenų (ne daugiau kaip 2%), ekstrakcinės medžiagos (ne mažiau kaip 33%), rudos ir juodos spalvos lapai (ne daugiau kaip 5%) ), organinių priemaišų (ne daugiau kaip 2%), mineralinių priemaišų (ne daugiau kaip 0,5%).

Žolės vištienos metinis. Drėgmė ne daugiau kaip 7%, bendras pelenų kiekis (ne daugiau kaip 9%), 10% vandenilio chlorido rūgštyje netirpūs pelenai (ne daugiau kaip 1%), ekstrakcinės medžiagos (ne mažiau kaip 42%), rudos ir juodos spalvos lapai (ne daugiau kaip 5%), organinės priemaišos (ne daugiau kaip 2%), mineralinės priemaišos (ne daugiau kaip 0,5%).

Remiantis preliminarios fitocheminės analizės rezultatais, Siverso ir P. žolėse buvo rasta eterinis aliejus, flavonoidai, taninai, hidroksichinaminės rūgštys, kumarinai, riebalų rūgštys ir sesquiterpeno laktonai.

„Sivers“ ir „P.“ atsargos vieneriems metams. 2 lentelėje pateikti duomenys apie „Sivers“ derlingumą, biologinius (BZ) ir eksploatavimo išteklius (EZ) ir metinius, augančius įvairiose Buriatijos vietovėse.

Siverių žaliavų atsargos ir vienerių metų biuratijos vietovėse

derliaus plotas (g / m2) bendras E užaugimas, (ha) BS (kg) EZ (kg)

env Gusinoozersko miestas 58,0 ± 4,1 0,8 530,0 398,4

env c. Ganzurino 33,8 ± 2,4 0,4 ​​154,4 116,0

env c. Boratai 220,6 ± 15,1 20,0 50160,0 41100,0

env Taphar 500,0 ± 26,3 0,5 2763,0 2237,0

env c. Sotnikovo 240,2 ± 19,4 25,0 69750,0 52850,0

env Ulan-Ude 500,0 ± 32,5 0,5 2815,0 2175,0

Kabansky rajonas 285.SH = 19,7 30,0 97320,0 73680,0

Tunkinskio rajonas 70,0 ± 8,0 0,2 172,0 108,0

Pribaikalskio rajonas 280,9 ± 25,3 1,0 3315,0 2297,0

Kurumkansky rajonas 370,6 ± 34,0 0,1 438,6 302,6

env c. Hurumsha 228,0 ± 10,8 0,6 1497,6 1238,4

env Gyventojų skaičius 500,0 ± 46,2 30,0 177720,0 122280,0

env c. Sotnikovo 39.0 ± 2.1 25.00 10800.0 8700.0

Kabansky rajonas 400,0 ± 27,1 30,0 136260,0 103740,0

Viršutinės Sivers kirminų dalies ir metinio pjūvio našumas ištirtose sėklidėse svyruoja nuo 33,8 ± 2,4 iki 500,0 ± 32,5 g / m2 ir nuo 39 ± 2,1 iki 500 ± 46,2 g / m2. Išanalizuotų augalų viršutinių dalių biologiniai ir eksploataciniai rezervai yra 154,4-97320,0 kg ir 116,0-73680,0 kg (Sivers kirmėlės), 1,497,6177720,0 kg ir 1238,4-122280,0 kg (metinė višta).

P. Siverio ir P. žolelių cheminis tyrimas apie metinius flavonoidus. Bendras kiekybinis flavonoidų kiekis buvo nustatytas pagal visuotinai priimtą metodą, nustatantį Sivers ir P. vienmečių žolės spektrofotometrinį nustatymą luteolino-7-gliukozido kiekiu įvairiuose augalų vystymosi etapuose (augmenija, želdėjimas, žydėjimas, vaisius). Didžiausias flavonoidų kiekis buvo nustatytas Severso ir vienerių metų mėginių, paimtų stadijos fazėje, mėginiuose - 0,68 ir 0,66%, mažiausias - iš vaisių fazėje surinktų žaliavų - 0,31% ir 0,38% (3 lentelė).

Flavonoidų kiekio kiekiai pagal luteolino-7-gliukozidą P. Siverio žolėje ir P. žolėje vienerius metus priklausomai nuo augmenijos fazės

augalų vystymosi fazė, flavonoidų kiekis pagal luteolino-7-gliukozidą (%)

Velykų Siveriai viščiukai kasmet

augmenija 0,67 ± 0,02 0,64 ± 0,04

švytintis 0,68 ± 0,05 0,66 ± 0,03

žydėjimas 0,48 ± 0,03 0,52 ± 0,02

vaisius 0,31 ± 0,01 0,35 ± 0,01

HPLC-MS metodu buvo nustatyti šie flavonoidai: rutinas, luteolinas-7-gliukozidas, chrovalidolis, kvercetinas Sivers žolėje ir vienerių metų žolėje (1 pav.).

1 pav. Vienų metų flavonoidų ir P. Siverio, P. Chromatograma.

Išorinio standarto metodas buvo naudojamas kiekybiniam rutino, chrizerio, kvercetino kiekiui Siverso žolėje ir vienerių metų žolėje nustatyti (4 lentelė).

Abiejų rūšių viščiukų, luteolino-7-gliukozido 0,04–0,08% (siveriai) ir 0,88–1,77% (n. Vienerių metų) kiekis yra didžiausias, 0,001% kvercetino (Sivers) ir 0,0070,009% (n vienerių metų).

Kiekybinis flavonoidų kiekis (HPLC-MS)

„Sivers Wormwood Flavonoid“ kolekcija (%)

rutino kvercetinas luteolinas-7-gliukozidas

Ivolginskio rajonas, okr. c. Taphar, 0,002 ± 0,0001 0,001 ± 0,0002 0,040 ± 0,003

Ivolginskio rajonas, okr. p. Sotnikovo 0,002 ± 0,0002 0,001 ± 0,0001 0,080 ± 0,005

FLY yra vienerių metų ir Ivolginsky rajonas, okr. p. Sotnikovo 0.018 ± 0.001 0,007 ± 0,0003 0,880 ± 0,004

Kabansky rajonas, okr. c. Gervės 0,012 ± 0,002 0,009 ± 0,0003 1,700 ± 0,005

Riebalų rūgštys. Sliekinių mėginiai turi nuo 8 iki 13 riebalų rūgščių. Dažni abiem rūšims yra palmitinas (16: 0), linolo (18: 2p6), linoleninės (18: ZpZ) rūgštys, 56,87-82,67% (iš visų riebalų rūgščių) Severs, 58,36-67,19% n vienerių metų (visų riebalų rūgščių). Be šių rūgščių, didelis kiekis yra 10-oktadekeno rūgšties (18: 1p8) nuo 3,64% iki 11,65%. Be to, visuose mėginiuose aptikta 10-metil-undekano (¡° 12: 0) ir 12-metil-tetradekano (ir 15: 0) rūgščių, kurių kiekis neviršija 1%. Chromatogramos pateiktos 2 paveiksle.

Fig. 2. Riebalų rūgščių chromatogramos (a) p. Sivers ir (b) p. Vienerių metų (I - (16: 0), 2 - (18: 2) 6, 3 - (18: ЗПЗ), 4 - (18: 1) 8) ).

Elementinė sudėtis. Siverių žolėje, augančioje įvairiuose Buriatijos regionuose, kalcio kiekis yra 0,56 ± 0,02-0,89 ± 0,03%, magnio - 0,12 ± 0,01-0,28 ± 0,01%. Didžiausias kalcio ir magnio kiekis pastebimas Kurumkansky rajone surinktiems mėginiams, mažiausiam magnio kiekiui žaliavose iš Tunkinsky rajono, ir kalcio augaluose, surinktuose Selenginsky rajone. Geležis dažniausiai randama iš Kurumkansky regiono augalų

(141,25 ± 12,13 mg / kg), mažiau - iš Selenginsky rajono (141,25 ± 12,13 mg / kg).

Cinko kiekis svyruoja nuo 23,73 ± 1,56 iki 59,8 ± 1,56 mg / kg - п. Siveriai ir nuo 55,32 ± 0,83 iki 66,50 + 0,89 mg / kg yra vienerių metų amžiaus, kuris yra priimtinas normaliam biocheminių procesų veikimui. Vario kiekis yra 8,42 ± 0,45-24,30 ± 1,56 mg / kg-n. Siveriai, 9,37 + 0,18-13,48 + 0,44 mg / kg - vienerių metų amžiaus (reikalingas kiekis yra nuo 5 iki 30 mg / kg). „Seabera“ žolėje esantis nikelis turi 0,40 ± 0,01 -2,06 ± 0,03 mg / kg, kuris atitinka 0,1–5 mg / kg augalų poreikį. Kobalto kiekis įmonėje neturėtų viršyti 1 mg / kg, švino - 10 mg / kg, kadmio - 0,2 mg / kg, chromo - 1,0 mg / kg (Kabata-Pendias, 1989; Kashin, 2009). „Sivers“ p. Kobalto kiekis yra mažesnis kaip 0,3 mg / kg, švinas yra 3,19 ± 0,11 mg / kg, p. Vienmetis - 0,59 ± 0,02 mg / kg, kadmio - 0,18 ± 0,02 mg / kg, chromo - 0,76 ± 0,02 mg / kg visuose mėginiuose. Taigi makroelementų ir mikroelementų kiekis yra normali ir pakankama gyvybinėms funkcijoms augalams.

Ešerių aliejus su kirmmedžio žolelėmis. Eterinis aliejus iš augalų buvo izoliuotas farmakopėjos metodu Nr. Įvairiuose p. Mėginių mėginiuose eterinio aliejaus kiekis svyruoja nuo 0,1 iki 1,9%. „Sivers“ eteriniuose aliejuose, augančiuose įvairiose Buratijos dalyse, buvo nustatyta daugiau kaip 80 junginių.

Ištyrėme eterinių aliejų, išskirtų iš Sivers kirmmedžio žolės, sudėties, kuri auga įvairiose Buriatijos vietose, sudėtį.

(Ivolginsky (1), Selenginsky (2), Kurumkansky (3), Pribaikalsky (4.9),

Tunkinsky (5), Zakamensky rajonai (8), Irkutsko regionas (Olkono sala) (6) ir Mongolija (7). Didžiausias eterinio aliejaus derlius yra Siverio audra, auganti Tunkinsky ir Kurumkansky regionuose (0,4%). Mažiausias alyvos kiekis buvo išskirtas iš augalų, surinktų Zakamenskio, Pribaikalskio regionų ir Mongolijos teritorijoje (0,1%) (3 pav.).

Eterinio aliejaus kaupimosi dinamika buvo tiriama priklausomai nuo augalų vystymosi fazės (4 pav.). Rezultatai parodė, kad didžiausią kiekį alyvos kaupiasi žydėjimo fazėje (0,6%)

Fig. 3. Eterinio aliejaus derlius p. Siveriai iš augimo vietos.

vaisių ir vaisių auginimo fazės sukaupia tą patį eterinio aliejaus kiekį (apie 0,3%).

1- 1,8-danolio I-terpineal-4 3-p-farmakologas '1 ■ sishna-4,11-dnen

Fig. 5. Eterinio aliejaus chromatograma p. Sivers.

Fig. 4. Eterinio aliejaus derlius p.

Siveriai skirtinguose augalų vystymo etapuose (auginimo sezonas, b - žandikauliai, c - žydėjimas,

Visi eterinio aliejaus komponentai gali būti suskirstyti į dvi grupes - pastovius, tai yra, aptinkami aliejuje visuose augalų vystymosi etapuose ir atsitiktinai atsirandantys (nedideli). Visuose „Sivers“ eterinio aliejaus mėginiuose, nepriklausomai nuo augalų ploto, 1,8-cineolio (2,34–22,57%), terpineol-4 (0,964.70%), germacreno E (8,66–12,36%), P-farnezen (0,64-5,17%), Selina-4,11-dien (0,97-4,66%), Neril-2-metilbutanoatas (4,80-8,79%) ir Chamazulene (0,60-25,36%) (5 pav.).

Eteriniai aliejai, išskirti iš stepių regionuose augančių augalų, Pribaikalsky rajone (25,36%), yra mažiausias Hamazuleno kiekis ir mažiausias - Zakamenskio rajone (0,60%).

Sudarant eterinį aliejų, išskirtą iš augalų skirtingais vystymosi etapais - augalija, žvėrys, žydėjimas ir vaisius, nustatyti 54 junginiai. Pastovūs komponentai yra 1,8-cyneolis, linalolis, terpineol-4, a-terpineolis, p-farnezenas, selina-4,11-dienas, chamazulenas.

Chamazuleno kiekis augmenijos fazėje svyruoja nuo 0,20 iki 24,69%, nuo 21,34 iki 61,91% žydėjimo fazėje, nuo 1,53 iki 34,42% žydėjimo fazėje, nuo 10,87 iki 20,64% vaisiaus fazėje. Sporadiškai atsirandančių komponentų rinkinys yra reikšmingas (iki 40 junginių) tuo pačiu metu mažas kiekybinis kiekis, todėl sunku nustatyti jų sudėties priklausomybę nuo augalų vystymosi etapo.

Siekiant įvertinti vystymosi etapo įtaką aliejaus komponentams, buvo naudojamas CIM (6 pav.).

Fig. 6. GK modelis priklausomai nuo kompozicijos

eterinis aliejus iš „Sivers“ vystymosi etapo (I-augmenija, 2-jaunieji, 3-žydintys, 4-vaisiai)

tai yra vienas iš analizės

daugiamačiai duomenys, leidžiantys paslėptus kintamuosius paskirstyti dideliuose duomenų masyvuose ir analizuoti santykius,

egzistuoja tiriamoje sistemoje. Pagrindinio komponento metodo tikslas yra pakeisti pradinį mėginių aprašymą naudojant p kintamuosius naujai formai, atstovaujamai pagrindinių komponentų erdvėje (Esbenson, 2010).

GK modelyje galima atskirti viena nuo kitos atskirtas atskiras sritis, atitinkančias skirtingus Sivers kirminų vystymosi etapus, o tai rodo, kad aliejaus sudėtis skirtinguose vystymosi etapuose skiriasi mažų junginių kiekiu.

Taigi, skirtinguose „Sivers“ vystymosi etapuose kokybinė eterinio aliejaus sudėtis sutampa ir smulkiais junginiais skiriasi.

Tyrimas apie augalų vystymosi etapus parodė, kad didžiausią sumą, esančią Seversos eteriniame aliejuje, sukoncentruoja žydėjimo ir žydėjimo fazėse, o aliejaus kaupimasis žydėjimo fazėje yra didesnis nei žydėjimo fazėje. Todėl šiais etapais nagrinėjome eterinių aliejų kaupimosi ypatumus įvairiose augalo dalyse (7 pav.).

Apie budėjimo etapą Žydėjimo fazėje

Fig. 7. Eterinio aliejaus derlius įvairiose Siverio dalyse.

ekstrahuojamas eterinis aliejus iš skirtingų augalų dalių žydėjimo fazėje parodė, kad žiedynai (krepšiai) pasižymi didžiausią derlių, lapai yra mažesni ir stiebai yra minimalūs. Fazėje

Poveikis P. Siverio žolėje daugiausia yra aliejaus pumpuruose, šiek tiek mažiau lapuose ir minimalų alyvų kiekį stiebuose.

Analizuojant eterinį aliejų iš skirtingų augalų dalių, paaiškėjo, kad sudėtingiausia Siverio žiedynų ir žolių pumpurų aliejaus sudėtis yra daugiau kaip 70 komponentų, tada daugiau kaip 40 komponentų iš lapų ir mažiau nei visi iš stiebų išgaunami junginiai yra maždaug 20 komponentai. Pastovios eterinių aliejų mėginių dalys, neatsižvelgiant į jų vietą, yra 1,8-cyneolis, linalolis, terpineol-4, germacren 13, a-terpineolis, a-bisabololis ir chamazulenas (5 lentelė).

Nuolatiniai Sivers Wormwood eterinio aliejaus komponentai

sudedamųjų dalių kiekis visame aliejuje%

žydėjimo fazė

žiedynai palieka stiebų pumpurų lapus

1,8-cineolis 8,00 6,39 6,04 1,94 + 23,41

linalool 5,93 1,38 0,65 + + 3,83

terpineol-4 2,56 2,10 0,57 0,88 + 5,37

a-terpineolis 2,39 2,10 0,82 1,44 + 4,66

Germakren E 7,20 7,81 1,96 11,18 7,81 10,57

a-bisabololis 2,28 1,25 1,66 5,24 10,93 5,86

Chamazulenas 6,23 23,02 37,11 7,81 21,17 3,51

Analizė parodė, kad įvairiose augimo srityse, skirtinguose plėtros etapuose ir skirtingose ​​Seversos dalyse, kokybinė eterinio aliejaus sudėtis sutampa ir skiriasi sporadiškai atsirandančiuose junginiuose.

Eterinis aliejus iš žolelių kirmėlės kasmet. Kaip ir pirmuoju atveju, eterinio aliejaus parinkimas buvo atliktas farmakopėjos metodu Nr. Cheminės sudėties p. Metiniai eteriniai aliejai yra 40 komponentų. Nuolatiniai komponentai yra artemizijos ketonas (10,24–14,62%), caryofilenas (9,93–10,71%), germakrenas B (3,53–7,82%), p-selenenas (21,75–29,46%), kariofileno oksidas (4,44–14,31%) (pav. 8).

Įvairiuose augalų vystymo etapuose iš kirminų žolės išgaunama nuo 0,5 iki 0,7% eterinio aliejaus. Didžiausias eterinio aliejaus derlius žydėjimo fazėje (0,7%) (9 pav.).

Visuose augalų vystymosi etapuose eteriniame aliejuje yra artemizijos ketonas, karyofilenas (3-selenas, kariofileno oksidas), o pagrindinių komponentų kiekybinis kiekis skirtingose ​​augalų vystymosi fazėse pasikeičia, artemizijos ketono kiekis yra didžiausias vaisiaus fazėje, P-selenene - vegetacijos fazėje. ir karyofileno oksidas - žydėjimo fazėje.

3. Eterinio aliejaus chromatograma p. Vieneri metai.

Fig. 9. Eterinio aliejaus derlius p. Metinis skirtingose ​​augalų vystymosi stadijose (augmenija, b-bud, c žydėjimas, p-vaisius).

Eteriniai aliejaus liaukos augaluose yra nevienodai pasiskirstę, todėl iš skirtingų augalų dalių galima išskirti eterinius aliejus, skiriasi tiek kiekybiškai, tiek kokybiškai.

Nustatyti eterinių aliejų kaupimosi žydėjimo fazėje ypatumai įvairiose kasmetinių viščiukų dalyse (10 pav.).

Įvairių augalų dalių eteriniuose aliejuose aptikta daugiau kaip 60 junginių. Pastovus

aliejų iš žiedynų, lapų, stiebų komponentai yra alkoholio alkoholis, p-kariofilis, oksidas

Pagrindinė metinio eterinio aliejaus sudedamoji dalis yra artemisia ketonas - tai nėra riebalų aliejuje, nors ji yra pusė žiedynų aliejaus (49,14%) ir beveik trečdalio lapų (29,76%).

Eterinių aliejų analizė parodė, kad įvairiose augimo srityse, skirtingose ​​vystymosi stadijose ir skirtingose ​​n. Metinėse žolėse, taip pat ir „Sievers“ žolėje, kokybiška eterinio aliejaus sudėtis yra tokia pati, kuri skiriasi nuo sporadiškai atsirandančių komponentų.

Artemizino kiekio kiekybinio nustatymo kirmėlės metodu metinis metodas HPLC-MS

Artemezinino kiekybinio išgavimo iš metinių varpelių parinkimas. Sukurti kiekybinę metodiką

1 2 pav. 10. Eterinio aliejaus derlius įvairiose metinėse dalyse (1-žiedynas, 2 lapai, 3 stiebai).

Buvo pasirinktas artemezinino nustatymas P. vienų metų senumo ekstrakcijos sąlygų žolėje, pagal kurią artemizinino ekstrahavimas pasiekia didžiausią vertę. Išnagrinėti ekstraktai, gauti naudojant maceravimo metodus, ultragarso ekstrakciją ir subkritinį CO2 ekstrahavimą. Kaip ekstrahentai buvo naudojami įvairūs tirpikliai (6 lentelė). Artemizinino kiekis ekstraktuose, atskirtuose ultragarsu ekstrahuojant ir maceruojant, naudojant skirtingus tirpiklius, reikšmingai nesiskiria (0,038-0,040%). Didžiausias artemizinino kiekis (0,054%) yra ekstrakte, gautame subkritinio CO2 ekstrahavimo metu.

Vienerių metų viščiukų žolės ekstraktų ekstrahavimo metodai ir parametrai įvairiais ekstrahavimo metodais ______

ekstrahavimo metodo ekstrakto ekstrakcijos laikas / ekstrahavimo parametrai artemisinino kiekis%, pagal a.s.s.

etanolis 24 val. / žaliavų santykis: tirpiklis (1: 5), T = 25 ° С 0,040 ± 0,002

Matavimo etanolis 48 val. / Žaliavų santykis: tirpiklis (1: 5), T = 25 ° С 0,038 ± 0,002

Heksanas 24 val. / Mėginys: tirpiklio santykis (1: 5), T = 25 ° С 0,039 ± 0,002

etilo acetatas 15 min. / žaliavų santykis: tirpiklis (1: 5), skambučio dažnis 50 kHz, T = 25 ° С 0,022 ± 0,001

etanolis 5 min. / žaliavų santykis: tirpiklis (1: 5), garso dažnis 50 KHz, T = 25 ° С 0,022 ± 0,001

Ultragarsinis etanolio ekstrahavimas 10 min. / Žaliavų santykis: tirpiklis (1: 5), garso dažnis 50 KHz, T = 25 ° С 0.024 ± 0.001

etanolis 15 min. / žaliavų santykis: tirpiklis (1: 5), garso dažnis 50 KHz, T = 25C, C 0,039 ± 0,002

etanolis 20 min. / žaliavų santykis: tirpiklis (1: 5), garso dažnis 50 kHz, T = 25 ° С 0,039 ± 0,002

CO2 išmetimas CO2 24 h.1 srautas 30 l / h, T = 20-22 ° C, P = 6,0-6,2MPa 0,054 ± 0,003

Iš visų siūlomų ekstrakcijos metodų, ultragarsinis ekstrahavimas yra optimalus (etanolio ekstraktas), nes šis metodas yra greitas (ekstrahavimo laikas 15 minučių) ir prieinamas prietaisais.

Artemizinino kiekybinio nustatymo metodas.

Metodas, skirtas metemidinino kiekybiniam nustatymui metinio augalo žolėje, buvo atliktas HPLC-MS. Naudojome Agilent 1200 HPLC su MC detektoriumi („jonų gaudyklė“) 6330, jonizacijos metodu - elektrospray. Eliuavimas atliktas izokratiniu režimu (50% (A): 50% (B)), pradinio buferio (A) - skruzdžių rūgšties vandeninio tirpalo (pH = 3) + 2 ml prisotinto amonio acetato tirpalo, eliuavimo buferio (B) - 100% sudėtis acetonitrilas. Eliuento tūrinis srauto greitis yra 0,5 ml / min., Švirkšto mėginio tūris yra -25 μl. Jonai buvo registruojami teigiamo krūvio jonų (SRM) stebėjimo režimu, kurio masė yra 300 (dėl to, kad į Artemisinino molekulę įdėta NrH4 jonų), lango plotis (299301) m / z. Rezultatai buvo patvirtinti tandeminės masės spektrometrijos metodu, iš pradinio jono (MS), kurio masė 300 m / z, buvo gauta 223 m / z masės dukra jonų (MS2).

Artemizinino sulaikymo trukmės ir masių spektro sutapimas, nustatytas vienerių metų žolėje, naudojant nurodyto junginio CO tirpalą, leidžia daryti išvadą, kad grynas junginys yra identiškas grynajam artemizininui (11, 12 pav.).

Fig. 11. CO artemizinino ir P. metinio ekstrakto chromatograma.

iv ix язтжяауат ассс »

12 pav. A) artemizinino masės spektrai, esantys n. Metinė žolė, b) artemizinino CO.

Chromatografijos ir masės spektrometrijoje kiekybinei analizei buvo naudojamas absoliutus kalibravimo metodas. Kalibravimo kreivės koeficientui nustatyti buvo paruošti keli (ne mažiau kaip 20) artemisizinino kalibravimo tirpalai. Tirpalų ruošimas atliktas taip: 5 x 10 "3 g artemizinino pasveriama, įdedama į 50 ml matavimo kolbą, įpilama 25 ml acetonitrilo.

kruopščiai sumaišykite, kol visiškai ištirps, po to kolba buvo išleista iki žymės distiliuotu vandeniu. Atlikta analizė skirtinguose injekcinio mėginio tūriuose nuo 1 iki 40 μl. Išmatuotas chromatogramų smailės plotas. Pagal gautus duomenis buvo sudaryta kalibravimo kreivė (13 pav.). Smailės ploto reikšmės buvo pavaizduotos ordinato ašyje, o atitinkamos artemizinino kiekio (g) vertės buvo pavaizduotos ant abscisės ašies.

Iš gautų duomenų apskaičiuotas kalibravimo kreivės koeficientas: к = Б / х, kur к yra kalibravimo kreivės koeficientas, 5 - analizuojamo tirpalo smailės plotas, х yra artemizinino kiekis (g).

Kalibravimo kreivės (k) koeficientas apibrėžiamas kaip koeficientų k, aritmetinis vidurkis.

Fig. 13. Artemizino kiekio nustatymo grafikas.

Artemizino kiekis vienerių metų viščiukų ekstrakte nustatytas pagal formulę: C = 5 / c, kur 5 yra artemisinino smailės plotas analizuojamame tirpale, o k - kalibravimo kreivės koeficientas. Metrologiniai duomenys apie kalibravimo kreivės koeficiento (k) nustatymą pateikti 7 lentelėje.

Kalibravimo kreivės artemizinino koeficiento skaičiavimo metrologinės charakteristikos

1 X Э2 Э Р ЮУ) Дх Е,%

19 1,32 * 10m 1,84 * О15 4,25 * 10 "95 2,09 1,28 * 10" 1,97 1,90 * 10 "

Artemizino kiekybinio nustatymo rezultatai košenės metiniame ekstrakte pateikti 8 lentelėje.

Artemizino kiekybinio nustatymo rezultatai viščiukų vienerių metų metodo HPLC-MS ekstrakte

Metrologinės charakteristikos (n = 5, P = 95%)

0,039 0,75 * 10 "'0,27 * 10" 2 2,57 0,83 * 10 ° 1,21 0,12 * 10 "

Sukurtas metodas nustatė artemezinino kiekybinį kiekį žolėje vienerių metų žydėjimo fazėje (9 lentelė). Technika yra patvirtinta - specifiškumas, tikslumas patvirtintas.

Artemezinino kiekis žolės kirmėse kasmet

Artemizinino sritis ir surinkimo data (%)

Ivolginskio rajonas, 10 km nuo Sotnikovo, 2010 12 08 0.054 ± 0.003

Ivolginhiy rn, 10 km nuo Sotnikovo, 2011/28/22 0.027 ^.001

Ivolginskio rajonas, okr. c. Oriole, 2011/01/19 0.069 ± 0.004

Kabansky rajonas, okr. c. Tarakanovka, 2011 2 08 0.023 ± 0.001

Ivolginskio regione esančiuose mėginiuose, esančiuose netoli „Oriole“ yra didžiausias artemizinino kiekis (0,069%), mažiausias - mėginiuose iš Kabansky rajono, okr. c. Liemenė (0,023%). Nustatyta, kad didžiausias artemizinino augalų kiekis koncentruojasi žydėjimo fazėje - 0,039%, mažiausias - augmenijos ir jauniklių fazėse - nuo 0,006 iki 0,007%. Artemizinino žiedynuose yra - 0,029%, šiek tiek mažiau - 0,021% lapų, o minimalus stiebo kiekis yra 0,007% (10 lentelė).

Artemizino kiekis kirmmedžio žolėje kasmet, priklausomai nuo augmenijos etapo, įvairiose augalų dalyse

kūrimo etapas

augmenija žadinantis žydėjimo lapai žiedyno stiebai

0,006 ± 0,0002 0,007 ± 0,0002 0,039 ± 0,003 0,021 ± 0,001 0,029 ± 0,002 0,007 ± 0,0002

Taigi optimalus metas viščiukų žolei surinkti yra žydėjimo fazė, todėl patartina surinkti visą anteną.

Visi gauti rezultatai yra įtraukti į FS projektus Sivers kirminų žolėje ir kasmetinės viščiukų žolės.

1. Nustatyti pagrindiniai Siverio ir P. vienerių metų žolės žolės diagnostiniai bruožai, sukurti skaitmeniniai žaliavų standartizavimo rodikliai. Nustatyti Siverio ir P. rezervai, augantys įvairiose Buriatijos Respublikos teritorijose.

2. Nustatytas flavonoidų, riebalų rūgščių, makro ir mikroelementų kiekis Sivers n žolėje ir n. Žolėje. Flavonoidai - luteolinas-7-gliukozidas, rutinas, kvercetinas ir chrizoolis buvo aptikti HPLC-MS metodu šiuose augaluose. Pagrindinės riebalų rūgštys tiriamose viščiukų rūšyse yra palmitinės, linolinės, linoleninės, 10% oktadekeniškos rūgšties, taip pat randamos didelėse viščiukų.

3. Nustatyta, kad kokybiška augalų eterinių aliejų sudėtis, nepaisant augimo vietos ir vystymosi etapo, išlieka pastovi. Pastovūs Siverio komponentai yra 1,8-cyneolis, terpineol-4, D germacrenas, p-farnesenas, Selina-4,11-dienas, neil-2-metilbutanoatas ir chamazulenas, ir Artemisia ketonas, karyofilenas, vienerių metų germacrenas D, p-selenenas, kariofilinis oksidas. Eterinio aliejaus kaupimasis žydėjimo fazėje yra didesnis (0,7 proc.) Nei žydėjimo etape (0,3 proc.). Didžiausias chamazuleno kiekis Siveriai kaupiasi jauniklių (iki 62%) ir žydėjimo (iki 34%) fazėse.

4. Nustatytos artemizinino (ekstrahuojančios medžiagos rūšys, ekstrahavimo metodas, ekstrahavimo laikas) ekstrakcijos sąlygos iš metinių žolių ir nustatyta, kad maksimalus artemizinino ekstrahavimas pasiekiamas naudojant ultragarso ir šaldymo CO2. Artemizinino kiekybinio nustatymo metodas buvo sukurtas ir patvirtintas vienerių metų HPLC-MS metodu (santykinė ± 1,21% nustatymo paklaida). Nustatyta, kad žiedynuose žydėjimo fazės metu didžiausią amidinino kiekį kasmetinės žolės žolėje kaupia (0,039%).

5. Sukurta žaliavų reguliavimo dokumentai - FS „Siverių kirmmedžio žolė“ projektas ir „Vienerių viščiukų žolės“ FS projektas.

Darbų tema skelbiamų darbų sąrašas

1. Zhigzhitzhapova, C.B. Cheminės sudėties eterinis aliejus Artemisia gmelinii Web. et Stechm, gimtoji Centrinėje Azijoje / C.B. Zhigzhitzhapova, TE Soktoeva, LD Radnaeva ir Augalų chemija.-2010.-№2.-С. 131-133.

2. Zhigzhitzhapova, C.B. Cheminės sudėties „Sivers“ kirmmedžio eterinio aliejaus Artemisia sieversiana Willd., Išaugintos Buriatijoje / S.V. Soktoeva, LD Radnaeva, V.V. Taraskin // Buriato valstybinio universiteto biuletenis. Ser. Chemija-fizika. - 2009 m. 3. - p. 69-71.

3. Zhigzhitzhapova, C.B. Sivers kirminų eterinio aliejaus sudėtis Artemisia sieversiana Willd., Auginama Buriatijoje ir Irkutsko regione / S.V. Žigžichapova, TE Soktoeva, LD Radnaeva, V.V. Taraskin // Rusijos medicinos mokslų akademijos Sibiro filialo Rytų Sibiro mokslo centro biuletenis. - 2009. - №2 (66). -C. 103-105.

4. Zhigzhitzhapova, S.V. Eterinio aliejaus sudėtis Artemisia sieversiana Willd. skirtingais augalų vystymosi etapais / S.V. Zhigzhitzhapova, TE Soktoeva, LD Radnaeva // Rusijos medicinos mokslų akademijos Sibiro filialo Rytų-Sibiro mokslo centro biuletenis. - 2011. - №1 (77). 2 dalis. 138-141 psl.

5. Soktoeva, TE Eterinio aliejaus komponento sudėtis Artemisia glauca Pall, ex Willd. Mongolijos / T.E. Soktoeva, S.V. Žigžichapova, LD

Radnaeva, B.B. Taraskin // Jaunųjų mokslininkų biuletenis. - Tomskas, 2011. -Vyp. 2. - p. 27-30.

6. Soktoeva, TE Cheminės sudėties eterinis aliejus Artemisia gmelinii Web. Et Stechm. / T.E. Soktoev // Lomonosovas-2009: XVI intern. Medžiagos. conf. studentams, absolventams ir jauniems mokslininkams. - Maskva, 2009. - p.

7. Zhigzhitzhapova, C.B. Eterinis aliejus iš košelė Gmelin floros Buriatija ir Mongolija / C.B. Zhigzhitzhapova, TE Soktoeva, LD Radnaeva // „Nauji augalų žaliavų chemijos ir chemijos technologijos pasiekimai“: IV All-Russia medžiagos. mokslo conf. - Barnaul, 2009. - 49–50 p.

8. Soktoeva, T.E. „Sivers wormwood Artemisia sieversiana Willd.“, Kuris auga Buriatijos Respublikoje / T.E. Soktoeva, C.B. Zhigzhitzhapova, LD Radnaeva // „Chemijos, biotechnologijos ir maisto pramonės technologijos ir įranga“: II Vseross medžiagos. mokslo konferencijoje studentams, absolventams ir jauniems mokslininkams. - Biysk, 2009. - 91–93 psl.

9. Pavlova E.T. Chromatografinis vaistų komponentų atskyrimas ir kiekybinis nustatymas HPLC / TE Soktoeva, T.A. Kolodinas // „Tvaraus regiono vystymosi problemos“: Rusijos jaunųjų mokslininkų 5-osios mokyklos seminaro medžiaga. - Ulan-Ude, 2009. - 222-223 p.

10. Zhigzhitzhapova, S.V. Centrinėje Azijoje / S.V. augančioje Artemisia L. cheminių kompozicijų lyginamoji analizė. Zhigzhitzhapova, T.E. Soktoeva, L.D. Radnaeva, O. Grahl-Nilsen // Septintasis žiemos simpoziumas apie chemometriją. - Sankt Peterburgas, 2010. - 82–83 psl.

11. Soktoeva, T.E. Artemisia L. genties polinijos eterinių aliejų sudėties lyginamoji analizė, išauginta Centrinėje Azijoje / TE Soktoeva // "Ekologiškos ir išteklių taupymo technologijos ir medžiagos": regiono medžiagos, jaunimo moksliniai. conf. iš Intern. dalyvavimas. - Ulan-Ude, 2010.-S. 109-110.

12. Zhigzhitzhapova, C.B. Artemisia L. / C.B. polinijos genties eteriniai aliejai. Zhigzhitzhapova, TE Soktoeva, LD Radnaeva // „Tradicinės medicinos plėtra Rusijoje: patirtis, tyrimai, perspektyvos“: medžiagos nauchn. conf. iš Intern. dalyvavimas. - Ulan-Ude, 2010. - p. 405-407.

13. Soktoeva, T.E. Eterinio aliejaus broliai ir seserys sliekų sudėtis Artemisia sieversiana Willd. / T.E. Soktoeva, C.B. Zhigzhitzhapova, LD Radnaeva // „Aktualios Baikalo Azijos studijos“: Intern. mokslo Conf, - Ulan-Ude, 2010. - 309-312 p.

14. Badmaeva, E.E. Eterinio aliejaus sudėtis Artemisia macrocephala Jacq. buvęs Bessas, augantis Mongolijoje / E.E. Badmaeva,

T.E. Soktoeva // „Rusijos ir gretimų teritorijų ekologija“: XV tarptautinės medžiagos. aplinkos apsauga - Novosibirskas, 2010. - 325 p.

15. Badmaeva, E.E. Eterinio aliejaus sudėtis Artemisia annua / EE. Badmaeva, T.E. Soktoyeva, C.B. Zhigzhitzhapova, LD Radnaeva // "Ekologiškos ir išteklių taupymo technologijos": medžiagos Vseross. jaunimo konferencija. iš Intern. dalyvavimas. - Ulan-Ude, 2011. -C. 156-157.

16. Soktoeva, T.E. Artemizino išgavimas iš košių mėsos Artemisia annua L. / T.E. Soktoeva, G.L. Ryžovas, K.A. Dychko, V.V. Khasanov, C.B. Zhigzhitzhapova, LD Radnaeva // „Baikalo regiono plėtros prioritetai ir ypatybės“: Vth tarptautinės medžiagos. mokslo conf. - Ulan-Ude, 2011. - p. 127-128.

17. Zhigzhitzhapova, C.B. Cheminė „Artemisia annua L. / C.B. Zhigzhitzhapova, TE Soktoeva, LD Radnaeva // „Baikalo regiono ir gretimų teritorijų augalija“: medžiagos iš Vseroso. mokslo conf. - Ulan-Ude, 2011. - p. 152-153.

AAS atominės absorbcijos spektrofotometrija

A.S. visiškai sausos žaliavos

BAS biologiškai aktyvios medžiagos

GZ biologiniai rezervai

BH popieriaus chromatografija

PSO Pasaulio sveikatos organizacija

HPLC-MS didelio efektyvumo skysčių masės chromatografija

GF valstybinė farmakopėja

Pagrindinių komponentų ISC metodas

CO standartinis mėginys

plonasluoksnės chromatografijos

EZ veiklos rezervai

SRM Pasirinkite reakcijos stebėjimą

Autorius nuoširdžiai dėkoja studijų vadovui, D.Sc., prof. LD Radnaeva, taip pat docentas, vyresnysis mokslo darbuotojas Rusijos mokslų akademijos Sibiro filialo Baikalo gamtos valdymo institutas Zhigzhitzhapova C.B. Tomsko valstybinis universitetas Ryzhova G.L. pagalba ir parama rengiant disertaciją.

Jis buvo pasirašytas spausdintame 11/21/2011 Formatas 60x84 1/16. Ofsetinis popierius. Tomas 1,5pech. l Apyvarta 100. Užsakymo numeris 67.

Atspausdinta leidyklos BNTS SB RAS spaustuvėje. 670047 Ulan-Ude, ul. Sakhyanova, 6.

Soktoevo disertacijos turinys, Tuyana Erdemovna :: 2011 :: Ulan-Ude

1 skyrius. LITERATŪROS APŽVALGA

Dabartinis Artemisia L. genties tyrimo tyrimas.

1.1. „Sivers“ viščiukų ir 12-oji viščiukų botanikos savybės

1.2. Eteriniai aliejai ir natūralūs Wormwood genties augalai

1.2.1. Cheminės sudėties eterinių aliejų ir natūralių 14 veislės Wormwood genties augalų sudėtis

1.2.2. „Wormwood“ genties augalų eterinių aliejų naudojimas medicinoje

1.2. Artemizininas: atradimas, struktūra ir sintezė, fizikinės ir cheminės 31 savybės, antiplasmodinio poveikio mechanizmas

1.3. Wormwood genties augalų riebalų rūgščių sudėtis

1.4. Wormwood genties augalų fenoliniai junginiai

1.5. Vyšnių genties augalų elementinė sudėtis 38 IŠVADOS Į SKYRIUS

2 SKYRIUS. OBJEKTŲ IR METODŲ CHARAKTERISTIKOS 41 TYRIMAI

2.1. Studijų objektai, žaliavų pavyzdžiai - Siverio viščiukų žolė ir 41 žolė viščiukų kasmet

2.2. Tyrimo metodai

2.2.1. Biologinių tyrimų metodai

2.2.1.1. Anatominis ir diagnostinis tyrimas

2.2.1.2. Išteklių tyrimai

2.2.2. 43 biologiškai aktyvių medžiagų kokybinio ir kiekybinio nustatymo metodai

2.2.3. Prekių analizė: 50 geros kokybės žaliavų kūrimo metodai

2.2.4. Statistinio apdorojimo metodai. Pagrindinis komponento metodas.

3 SKYRIUS. HERBALIO HERBALIO FARMAKOGNOSTIKOS ANALIZĖ 53 CIVERS

3.1. „Sivers“ kirmmedžio žolės mikroskopinė analizė

3.2. Sibers kirmmedžio atsargos

3.3. Pagrindinės BAS žolės brolių ir seserų audra tyrimas

3.3.1. Komponentų kokybinis ir kiekybinis kiekis 64 „Sivers“ kirmmedžio eterinis aliejus

3.3.1.1. Eterinio aliejaus ir 64 hamazulenos cheminės sudėties ir dinamikos Sivers kirminų žolėje įvairiose Buriatijos vietose

3.3.1.2. Eterinio aliejaus ir chamazuleno susikaupimo ypatumai 65 Sivers kirminų žolėje įvairiuose augalų vystymo etapuose

3.3.1.3. Smulkių žolės eterinio aliejaus sudedamųjų dalių kaupimasis 71 Sivers kirminas

3.3.1.4. Eterinio aliejaus ir chamazuleno kaupimosi žolėje ypatybės 72 Siveris kirminas iš skirtingų augalų dalių

3.3.2. Kokybinis ir kiekybinis flavonoidų ir taninų kiekis Sivers kirminų žolėje

3.3.3. Sivers kirminų žolės riebalų rūgščių sudėtis

3.3.4. Elementinė žolelių lapuočių metinė sudėtis IŠVADOS SKYRIUS

4. SKIRSNIS. GYVŪNINIŲ ŠUNŲ FARMAKOGNOSTIKOS ANALIZĖ 83 Vieni metai

4.1. Žolelių kirmėlės metinė mikroskopinė analizė

4.2. Kasmetinės sliekinių atsargos

4.3. Pagrindinės BAS žolės sliekinių tyrimas

4.3.1. Kasmetinis žolelių kirmmedžio eterinio aliejaus komponentų kokybinis ir kiekybinis kiekis

4.3.1.1. Eterinio aliejaus susikaupimo cheminė sudėtis ir dinamika 92 žolėje iš vienerių metų viščiukų iš skirtingų augimo vietų

4.3.1.2. Eterinio aliejaus kaupimosi viščiukų žolėje ypatumai metiniuose skirtinguose vystymosi etapuose ir skirtingose ​​augalų dalyse

4.3.2. Metinė flavonoidų žolės kokybinė ir kiekybinė nustatymas

4.3.3. Žolinių košenų metinė riebalų rūgščių sudėtis ^ ® *

4.3.4. Metinė žolelių kirminų sudėtis

4.4. Artemizinino kiekybinio nustatymo metodo sukūrimas 103 žolės kirmėlėse pagal metinį HPLC-MS metodą

4.4.1. Artemizinino kiekybinio išgavimo iš 103 vienerių metų viščiukų parinkimas

4.4.2. Artemizinino 104 kiekybinio nustatymo metodo sukūrimas HPLC-MS

4.4.3. Kiekybinis artemizinino kiekis kasmetinėje skirtingose ​​augimo vietose

4.4.4. Artemezinino kiekio turinyje žolėje kiekybinio kiekio analizė 107 kirmėlės metinis skirtingais vystymosi etapais ir skirtingose ​​augalų dalyse

5 SKYRIUS. RODIKLIŲ NUSTATYMAS 111 GELEŽINKELIŲ MEDŽIAGŲ GERINIMAS

5.1. Morfometriniai žaliavų rodikliai

5.2. Žolės brolių ir seserų viščiukų standartizavimas

5.2.1. Merchandising rodikliai žolė Palangės sliekai!

5.2.2. Sivers kirminų žolelių standartizavimas pagal 115 hamazulelen turinį eterinio aliejaus sudėtyje

5.2.3. „Sivers“ viščiukų žolės galiojimo laiko nustatymas

5.3. Žolelių kirmėlės metinis standartizavimas ^ ^ ^

5.3.1. Prekių rodikliai žolės šepetys kasmet * '^

5.3.2. Žolelių košenės metinis standartizavimas pagal artemizinino kiekį

5.3.3. Kasmetinis žolelių kirminų laikymo trukmės nustatymas

Baigiamojo darbo tema „Farmacijos chemija, farmakognozija“, Soktoeva, Tuyana Erdemovna.

Temos aktualumas. Artemisia genties augalai yra daug žadantys biologiškai aktyvių medžiagų šaltiniai, pvz., Tarragono kirmmedis Artemisia dracunculus L., ožkmedis Artemisia absinthium L., plaukuotas medus Artemisia vulgaris L. plačiai naudojamas liaudies, tradicinėje medicinoje ir maisto pramonėje. „Artemisia annua L.“, kasmetinė viščiukas, buvo sėkmingai įvežta į kultūrą daugelyje šalių, o 2001 m. Rekomendavo PSO kaip pagrindinį artemizinino, pirmos eilės gydymo malarija, šaltinį. Šiandien artemisininą gaminančios šalys sudaro apie ketvirtadalį pasaulinių sveikatos poreikių [1, 2]. 137 metų biologiniai aktyvūs junginiai buvo izoliuoti, įskaitant 40 sesquiterpenes, 10 triterpenų, 7 kumarinus, 46 flavonoidus, kurie gali būti vaistų kūrimo pagrindas [3]. XX a. Dešimtojo dešimtmečio mokslininkų grupė [4] bandė užauginti laukinių augalų dalį vienerių metų TSRS floros ULI (Maskva). Šiandien Tomsko valstybiniame universitete atliekami svarbiausi darbai, skirti pirmųjų metų pristatymui. Buriatijoje n. Metinė yra laukinių augalų rūšis.

Kartu su vienerių metų amžiaus Buriatuje, Sivers kirminas Artemisia sieversiana Willd yra plačiai paplitęs, taip pat perspektyvi rūšis. P. Sievers žolėje yra flavonoidų, eterinio aliejaus, kumarinų [5-8]. „Seabera“ eterinis aliejus domina chamazuleno, netoksiško junginio, turinčio priešuždegiminį, baktericidinį, regeneracinį poveikį, šaltinį [9, 10].

Iki šiol išsamus metinis Buriatijos floros augalijos „Sivers“ audra ir kirmėlės tyrimas nebuvo atliktas kaip perspektyvūs biologiškai aktyvių medžiagų šaltiniai, todėl jų tyrimas yra neatidėliotinas uždavinys.

Tikslas: Farmakognostinis tyrimas su Sivers kirminais Artemisia sieversiana Willd. metinis „Artemisia annua L.“ kaip vertingas biologiškai aktyvių medžiagų šaltinis.

Siekiant šio tikslo būtina išspręsti šias užduotis:

1. Nustatyti antžeminių Siverio dalies anatominius ir diagnostinius požymius p. Ir p. Vienerius metus, nustatyti žaliavų prekių rodiklius, įvertinti atsargas ir galimybę surinkti vienerius metus ir Siverius Buriato Respublikos teritorijoje;

2. Ištirti šių augalų biologiškai aktyvių medžiagų pagrindinių grupių cheminę sudėtį ir nustatyti jų kiekybinį turinį, nustatyti eterinių aliejų ir artemizinino lokalizaciją atskirose augalų dalyse, tirti jų kaupimosi dinamika vystymosi fazėse ir nustatyti optimalias surinkimo sąlygas;

3. Sukurti artemizinino kiekybinio nustatymo metą vieno metų amžiaus ore;

4. Nustatyti pagrindinių biologiškai aktyvių medžiagų turinio rodiklius ir standartus, parengti vaistų žaliavų reguliavimo dokumentaciją - Sivers kirminų žolę ir vienerių metų viščiukų žolę.

Mokslinė naujovė. Nustatyti pagrindiniai Siverio ir P. metinės žolės diagnostiniai bruožai, sukurti skaitmeniniai žaliavų standartizavimo rodikliai.

Buvo atliktas tyrimas apie Siverio žolės ir vienerių metų žolės cheminę sudėtį. Nustatytas eterinių aliejų, flavonoidų, riebalų rūgščių, makro ir mikroelementų kiekis. Flavonoidai - luteolinas-7-gliukozidas, rutinas, kvercetinas ir chrizoolis buvo aptikti HPLC-MS metodu šiuose augaluose. Pagrindinės riebalų rūgštys tiriamose viščiukų rūšyse yra palmitinės, linolinės, linoleninės, 10% oktadekeniškos rūgšties, taip pat randamos didelėse viščiukų.

Nustatyta artemizinino (ekstrahavimo, ekstrakcijos metodo, ekstrahavimo laiko) išgavimo iš metinių žolių sąlygos ir nustatyta, kad maksimalus artemizinino ekstrahavimas pasiekiamas ultragarsu ir subkritiniu CO2 išskyrimu. Pagal HPLC-MS nustatyta, kad didžiausias menemidino kiekis vienerių metų amžiaus žiedynuose yra žydėjimo fazėje.

Ištyrė eterinio aliejaus kaupimosi dinamiką, priklausomai nuo vystymosi etapo ir augalo dalies. Didžiausias kiekis chazazuleno eterinio aliejaus p. Siversa kaupiasi žiedynų žydėjimo ir žydėjimo fazėse.

Nustatyti BAS kokybės rodikliai įtraukti į reguliavimo dokumentus.

Praktinė reikšmė. Siverso gyvenvietės rezervai ir galimas metinis viešųjų pirkimų apimtis bei vienerių metų atsiskaitymas Buriato Respublikos teritorijoje (Siverso gyvenvietė - nuo 0,1 iki 73,7 tonų per metus, vienerių metų atsiskaitymas nuo 1,2 iki 122,3 tonų per metus).

Metodas buvo sukurtas artemizinino kiekybiniam nustatymui p. Grass metiniame HPLC-MS metode. Molekulinio artemizinino kiekybinio nustatymo žaliavų mėginio paruošimo sąlygos yra moksliškai pagrįstos.

Atlikta žaliavų standartizacija, sukurti FS projektai - „Sivers Wormwood Herbal“ ir „Wormwood One-Year Grass“.

Įgyvendinimo laipsnis. Eterinių aliejų ir mikroskopinių analizės duomenų išgavimo metodas buvo išbandytas ir įtrauktas į Federalinio valstybinio aukštojo mokslo įstaigos „Buryat State University“ Farmacijos departamento edukacinį procesą (2011 m. Rugsėjo 6 d. Įgyvendinimo įstatymas Nr. 1). FS projektai „Siverio viščiukų“ ir vienerių metų viščiukų žolei yra paruošti svarstyti.

Darbo aprobavimas. Pagrindinės disertacijos nuostatos buvo pristatytos ir aptartos: mokslinėje-praktinėje konferencijoje su tarptautiniu dalyvavimu „Tradicinės medicinos plėtra Rusijoje: patirtis, moksliniai tyrimai, perspektyvos“ (Ulan-Ude, 2010); 7-asis žiemos simpoziumas apie chemometriją „Šiuolaikiniai duomenų analizės metodai“ (Sankt Peterburgas, 2010); tarptautinė mokslinė konferencija, skirta „Buriato valstybinio universiteto„ Baikalo Azijos studijos “15-mečiui (Ulan-Ude, 2010); V tarptautinė mokslinė-praktinė konferencija „Baikalo regiono plėtros prioritetai ir ypatybės“ (Ulan-Ude, 2011); X tarptautinė mokslinė-praktinė konferencija „Pietų Sibiro ir Mongolijos botanikos problemos“ (Barnaul, 2011); IV All-Russian Conference „Nauji augalų medžiagų chemijos ir chemijos technologijų pasiekimai“ (Barnaul, 2009); XVI Tarptautinė studentų, antrosios pakopos ir jaunųjų mokslininkų konferencija „Lomonosovas-2009“ (Maskva, 2009); XV Tarptautinė ekologinė studentų konferencija „Rusijos ir gretimų teritorijų ekologija“ (Novosibirskas, 2010); II Visos Rusijos mokslinė-praktinė studentų, absolventų ir jaunųjų mokslininkų konferencija „Chemijos, biotechnologijos ir maisto pramonės technologijos ir įranga“ (Biysk, 2009); Visų Rusijos mokslinė-praktinė konferencija „Baikalo regiono ir gretimų teritorijų augalija“ (Ulan-Ude, 2011); V Rusijos jaunųjų mokslininkų mokyklos seminaras „Tvaraus regiono vystymosi problemos“ (Ulan-Ude, 2009); regioninė jaunimo mokslinė-praktinė konferencija, kurioje dalyvauja tarptautinis dalyvavimas „Ekologiškos ir išteklių taupymo technologijos ir medžiagos“ (Ulan-Ude, 2010).

Darbas atliktas kaip mokslinių tyrimų projektų dalis: RFBR: Nr. 08-04-90202-Monga „Vidurinės Azijos biologiškai aktyvių junginių biosintezės biogenetinių modelių tyrimas“ (2008–2009), Nr. 08-04-9803 7-rsibirija ir

Cheminė augalų sudėtis, kaip Baikalo regiono ekosistemų būklės rodiklis “(2008-2010); tarpdisciplininis integracijos projektas №93 „Mokslinių tyrimų plėtra medicinos chemijos ir farmakologijos srityje, kaip mokslinis pagrindas narkotikų vystymui“; bendras projektas su Mongolijos mokslų akademija „Naujų narkotikų, naudojančių natūralias žaliavas, lipo ir nanosominių formų gavimas“; RFBR: № 10-03-16001-mobzros „Jaunųjų mokslininkų mobilumas“ (2010), №11-03-90705-jaunųjų Rusijos mokslininkų mokslinis darbas (mokymas) pirmaujančiose Rusijos Federacijos mokslo organizacijose 2011 (2011).

Leidiniai. Remiantis gautais rezultatais, buvo paskelbti 17 mokslinių straipsnių, iš kurių 3 buvo paskelbti Rusijos Federacijos Gynybos ir mokslo ministerijos Aukštojo atestavimo komisijos rekomenduojamuose periodiniuose leidiniuose.

Atsakymas į gynybą:

• Buryatijoje augančio Siverio ir P. anatominės struktūros, atsargų, autentiškumo kriterijų tyrimo rezultatai;

• biologiškai aktyvių medžiagų cheminio tyrimo rezultatai ir jų sezoninė kaupimosi dinamika;

• Siverio viršutinės dalies standartizavimo tyrimų rezultatai p. Ir p.

Daugiau Straipsnių Apie Orchidėjų